“雌雄大老千”是一套別開生面的二十集時裝劇，它展示了九十年代香港社會功利的一面，但同時，亦對人的愛情、友情、親情予以肯定。
柯平坦〈張兆輝〉本來是一個小職員，但被自小相識的好友葉國基〈楊得時〉所利用，身陷牢獄，令坦一生起了轉變。
坦在獄中認識了梁亞雞〈李顯明〉二人遂成了好友，坦出獄后逼于生活，跟著雞成了一個小老千，四處招搖撞騙，一次二人無意遇上了大老千呂清為〈王偉〉，被為看中并收坦為徒。
坦自此便跟著為晉身成一個大老千，但一次誤會，令坦與為打賭，二人打睹誰先騙到橡膠皇后阮希靈〈周海媚〉，誰知到頭來，靈才是最大的老千，其后更惺惺相惜，便合作起來，坦在靈與為的教導下，成了一個專偷女人心的情場老千，而坦、靈在這段期間，亦互生了情愫。
當坦正對富家女方敏兒〈陳梅馨〉行騙之時，發覺兒對自己用情極深，于是打算收手不干，此時基卻竟以大企業家的身份回到香港，基還再利用坦對自己的信任來幫助這行商業大騙案。
坦在靈、兒及身邊好友相繼被基陷害之后，才如夢初醒、決心向基進行大報復………
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